Hvala vam što ste posjetili Nature.com.Verzija pretraživača koju koristite ima ograničenu podršku za CSS.Za najbolje iskustvo, preporučujemo da koristite ažurirani pretraživač (ili onemogućite način kompatibilnosti u Internet Exploreru).U međuvremenu, kako bismo osigurali kontinuiranu podršku, prikazat ćemo stranicu bez stilova i JavaScripta.
Posttraumatski stresni poremećaj (PTSP) karakterizira oštećenje sposobnosti da se neutraliziraju reakcije straha na znakove povezane s traumom.Studije na ljudima i životinjama ukazuju na razlike u uključenosti određenih područja frontalnog korteksa kao ključnih medijatora koji određuju uspjeh suzbijanja straha, ali međudjelovanje neuronskih krugova koji određuju različitu uključenost ovih područja nije jasno.Da bismo bolje razumjeli kako se individualne razlike u prisjećanju izumiranja odražavaju na razlike u aktivnosti neuronskih kola, označili smo projekcije iz sublimbičkog korteksa štakora (IL) retrogradnim tragačima i uporedili neuronske projekcije unutar i izvan neurona projekcije IL.Analizirali smo ove podatke, grupirajući ih prema stepenu očuvanja bledeće memorije kod pacova.Otkrili smo da u ćelijama koje projiciraju IL, neuroni u stražnjem paratalamusu pokazuju povećanu aktivnost kod pacova, što je pokazalo dobro prisjećanje na izumiranje.Pored ćelija koje projiciraju IL, povećana Fos aktivnost je uočena u odabranim područjima klaustruma štakora i ventralnog hipokampusa sa dobrom rezolucijom.Naši rezultati pokazuju da su razlike u prisjećanju na izumiranje povezane sa specifičnim obrascima neuronske aktivnosti unutar i izvan IL projekcija.
Uslovljavanje straha nastaje kada je neutralni stimulus povezan sa averzivnim bezuslovnim stimulusom (UCS), tako da prvobitno neutralni stimulus, sada uslovni stimulus (CS), izaziva uslovljeni odgovor straha (CR) u odsustvu UCS.Preokret uslovljenog straha bio je vođen smanjenjem CR u CS zbog ponovljene prezentacije CS u odsustvu UCS1.Prethodna istraživanja su pokazala da je posttraumatski stresni poremećaj (PTSP) povezan s nemogućnošću pamćenja izumiranja uvjetovanih reakcija straha2.Kamen temeljac kognitivne bihejvioralne terapije za liječenje posttraumatskog stresnog poremećaja je terapija izloženosti koja se temelji na izumiranju naučenih odgovora na strah3,4.Stoga, studije individualnih razlika u strahu od izumiranja glodara i temeljnih neuronskih mehanizama mogu pomoći u razjašnjavanju razlika u ljudskim odgovorima na traumu i liječenju posttraumatskog stresnog poremećaja.Uprkos napretku u identifikaciji neuronskih mehanizama koji razlikuju uspješna od neuspješnih sjećanja na izumiranje, još mnogo toga ostaje da se otkrije.
Modeli glodara su korisni u ovom radu jer postoje značajne individualne razlike u sjećanju na izumiranje glodara7,8,9,10.Prethodni rad koji je istraživao neuronske mehanizme izumiranja straha na nivou populacije pokazao je da je aktivacija infralibičnog korteksa (IL) potrebna za prisjećanje na izumiranje (ref. 11, 12, 13, ali vidjeti 14), a neke studije su otkrile smanjenje aktivnost glodara u IL-u pokazuje slabo pamćenje o izumiranju u poređenju sa glodarima, kojih se dobro plaši.Međutim, nisu jasni mehanizmi pomoću kojih su IL različito uključeni u olakšavanje eliminacije straha kod glodara u odnosu na one koji pokazuju slabije izumiranje.
Jedna od mogućnosti je da su razlike u memoriji izumiranja straha među pojedincima rezultat diferencijalne aktivacije specifičnih aferentnih IL-a.Anatomske studije18 su pokazale da različite kortikalne i subkortikalne oblasti mozga šalju guste projekcije na IL, koji zauzvrat šalje eferentne projekcije u mnoga područja mozga.Studije na populacijskom nivou su pokazale da su IL projekcije na amigdalu važne za sticanje izumiranja straha20,21,22, a unos IL iz bazolateralne amigdale (BLA) je također povezan sa učenjem o izumiranju.Manje je istraživanja o uključenosti krugova usmjerenih na IL u prisjećanju na izumiranje, iako nedavni radovi sugeriraju da su i ventralni i dorzalni hipokampus uključeni u predviđanje IL.Eferentne projekcije IL-a na rekombinirajuće jezgro talamusa, očigledno, također sudjeluju u sjećanju na izumiranje straha.
Ove prethodne studije počinju da oslikavaju interakciju neuronskih kola uključenih u prisjećanje na izumiranje, ali postoji vrlo malo podataka o tome da li aktivnost u neuronskim krugovima s IL-om utječe na individualne razlike u prisjećanju na izumiranje.Ovdje smo nastojali utvrditi jesu li razlike u memoriji izumiranja straha između pojedinaca povezane s promjenama u aktivaciji unosa IL u određenim regijama mozga.Posebno smo procijenili aktivaciju aferentnih ćelija IL u paraventrikularnom jezgru talamusa (PVT), klavikule (CLA), BLA i ventralnog hipokampusa (vHPC).Ove regije mozga su odabrane i zato što šalju guste projekcije na IL i zato što postoji razlog za sumnju da bi mogle biti uključene u izražavanje izumiranja straha 18 .Na primjer, nedavna studija je pokazala da je PVT, regija za koju se zna da je uključena u stjecanje straha i reprodukciju, potrebna za reprodukciju izumiranja.Pored toga, prethodne studije su pokazale povećanu aktivnost bazalne amigdale i vHPC kod pacova koji izražavaju pamćenje na izumiranje.Konačno, analiza klaustruma je više istraživačka s obzirom na to da nijedan od prethodnih radova nije procijenio njegovu ulogu u izumiranju.Međutim, nedavni radovi sugeriraju da on igra ulogu u kontekstualnom uslovljavanju straha29.
Virusni GFP-konjugirani retrogradni tragači su ubrizgani u IL pacova prije bihevioralnog testiranja, a Fos aktivnost u IL aferentima je mjerena tokom ponavljanja izumiranja, prisjećanja straha i kod pacova koji nisu bili podvrgnuti testiranju ponašanja.Naši rezultati pokazuju da projekcije od stražnjeg paraventrikularnog talamusa do IL pokazuju povećanu aktivnost kod pacova koji se uspješno prisjećaju izumiranja.Pored predviđanja IL, neuronska aktivnost u određenim područjima klavikule i ventralnog hipokampusa je povećana kod pacova koji su dobro regresirali.Naši rezultati pokazuju da su obrasci unutrašnje i ekstrinzične neuronske aktivnosti projektovane na IL povezani sa individualnim razlikama u memoriji izumiranja straha.
Pedeset četiri odrasla mužjaka Sprague-Dawley štakora (300-325 g po dolasku) dobijena iz Charles River Laboratories (Raleigh, NC) su korištena kao subjekti.Pacovi su bili smješteni u parovima, sa slobodnim pristupom hrani i vodi, na 12-satnom ciklusu svjetlo/mrak (svjetlo je uključeno u 7 ujutro).Za ove eksperimente korištene su dvije grupe pacova (n = 28 i n = 26).Nakon isključenja smrti, hirurške greške, nedostatka ekspresije GFP-a na ciljnom mjestu, lošeg kvaliteta tkiva i problema u ponašanju (objašnjeno u Metodama), grupa za opoziv izumiranja uključivala je 21 pacova, a grupa za opoziv straha uključivala je 7 pacova u kućnim kavezima.grupu je činilo 7 pacova (35 pacova je uključeno u finalnu analizu).Sve procedure je odobrio Institucionalni odbor za njegu i korištenje životinja Univerziteta Stony Brook i bili su u skladu sa Smjernicama ARRIVE (https://arriveguidelines.org) i NIH smjernicama za njegu i korištenje laboratorijskih životinja.
Pacovi su tretirani dva dana prije operacije.Pacovi su anestezirani ketaminom (87 mg/kg) i ksilazinom (10 mg/kg), stavljeni u stereotaksički aparat (Stoelting, Woodale, IL) i primili su jednostrane injekcije AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) u IL.(uravnotežite lijevu i desnu injekciju).Za injekciju, kanila od 22 kalibra spuštena je na svoje mjesto (AP: + 3,00, ML: ± 0,6, DV: – 5,2).Umetnite unutrašnju kanilu od 28G (povezanu sa infuzijskom pumpom preko PE 20 cijevi) u kanilu za vođenje da biste isporučili 0,6 µl virusa brzinom od 0,15 µl u minuti i ostavite na mjestu 5 minuta nakon što je infuzija netaknuta..Nakon šivanja, pacovima je ubrizgan meloksikam (1 mg/kg) i čim su se mogli kretati vraćeni su u kaveze.Pacovi su držani u kavezima oko 7 sedmica kako bi se omogućio oporavak virusa i retrogradni transport.Tri pacova su umrla pod anestezijom, što je rezultiralo uspješnim oporavkom od operacije 51 štakora (94%).
Sve procedure su izvedene u komorama za kondicioniranje dimenzija 32 cm × 25 cm × 21 cm (Clever Systems Inc., Reston, VA) smještenim u kutijama za izolaciju zvuka dimenzija 45,7 cm × 43,2 cm × 43,2 cm (Clever Sys. Inc.).).Tokom sesija učenja o izumiranju i prisjećanja na izumiranje, kontekst je promijenjen kako bi se razlikovao od izvornog uvjetnog konteksta.Uvjet A (generacija straha) uključivao je 28-voltne žarulje sa žarnom niti, kućne žarulje (Chicago Micro Lighting, UK), dok je uvjet B (trening izumiranja, test prisjećanja na izumiranje i test prisjećanja straha) uključivao infracrvene LED lampe (Univivi IR Illuminator, Shenzhen) ., Kina;U48R).Osim toga, dok Context A ima pod sa antivibracijskim letvicama sa zidovima od nehrđajućeg čelika i pleksiglasa, Context B sadrži obojene metalne umetke postavljene na pod i zidove.Oblik Context B je također modificiran postavljanjem zakrivljenog metalnog umetka dimenzija 33,5 cm x 21,3 cm u standardnu ​​komoru za kondicioniranje.Pored toga, u kontekstu A komore su obrisane sa 5% sirćetne kiseline, dok su u kontekstu B komore obrisane sa 5% amonijum hidroksida.Konačno, u kontekstu B, pacovi su dovedeni u prostoriju za testiranje u kantama umjesto da su valjani u kavezima na kolicima.Sesije ponašanja su snimljene gornjom kamerom, a video signal sa svake kamere je unesen u softver (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA) koji je procenjivao ponašanje bledenja na osnovu promena piksela.Parametri su odabrani tako da se ponašanje bleđenja koje je procijenilo kompjuterom blisko poklapa sa ponašanjem obučenih posmatrača procijenjenim ručno.Vrijednost koja pokazuje postotak vremena zamrzavanja skupljanog u intervalu od 30 sekundi.
Svi programi ponašanja se izvode tokom svjetlosnog dijela ciklusa svjetlo/mrak.Pacovi su tretirani 5 dana prije početka bihejvioralnih procedura i prevezeni u bihejvioralni prostor za posljednja tri dana tretmana.Prvog dana testiranja ponašanja, grupa štakora za prisjećanje na izumiranje stavljena je u uvjetovani refleks straha, zatim u kontekst A, uz 6-minutni nestimulirani period aklimatizacije, a zatim im je data obje kombinacije od 4 kHz, 76 dB, 30 s. .ton i ukupni završetak, 1,0 mA, udarac 1 s (2 min ITI).Za sve treninge ponašanja, pacovi su vraćeni u kaveze 2 minute nakon posljednje prezentacije stimulusa.Sljedećeg dana, pacovi iz grupe za opoziv izumiranja smješteni su u kontekst sobu B i izveli 20 zvučnih prezentacija (2 min ITI) kao trening za izumiranje nakon 6-minutnog perioda navikavanja.Sljedećeg dana, pacovi u grupi za reprodukciju izumiranja bili su izloženi 4 tona u kontekstu B nakon 6-minutnog perioda aklimatizacije kao testa izumiranja.Pacovi u grupi za pamćenje izumiranja perfuzirani su 60 minuta nakon sesije ponašanja.Grupa kontrolnih pacova koji izazivaju uspomene na strah podvrgnuta je istoj proceduri prvog dana uslovljenog odgovora strahom u kontekstu A. Četrdeset osam sati kasnije, štakori su smješteni u kontekstualnu sobu B i podvrgnuti 4 audio prezentacije (2- minuta ITI) kao test opoziva.strah nakon 6-minutnog perioda aklimatizacije.Pacovi su perfuzirani 60 minuta nakon sesije ponašanja.Grupa domaćih kontrolnih pacova ostala je u svojim kućnim kavezima tokom eksperimenta i perfuzirana je istog dana kao i eksperimentalni pacovi.Svaka od dvije grupe pacova podijeljena je u dvije serije, a broj životinja u svakoj grupi bio je uravnotežen između serija.Jedan pacov u grupi sa pamćenjem straha isključen je iz analize jer nije pokazivao znakove uslovljenosti strahom (smrzavanje manje od 15% vremena tokom testa sjećanja na strah).Pogledajte sliku 2A za dijagram vremenske linije ponašanja.
Pacovima je predozirano Fatal Plus otopinom (100 mg/kg), a zatim perfuzirano sa ledeno hladnim 10% PBS, a zatim 10% puferiranim formalinom.Mozak je uklonjen i čuvan u 30% rastvoru saharoze u formalinu na 4°C oko 1 nedelju.Zatim je mozak zamrznut i izrezan u kriostat debljine 40 µm.Sekcije su pohranjene uzastopno u 10% PBS na 4°C.Zatim je izvedena imunofluorescencija na slobodno plutajućim dijelovima koji sadrže područje mozga od interesa.Sekcije su isprane 3 puta u 10% PBS-u po 5 min.Sekcije su zatim inkubirane u 5% blokirajućem rastvoru normalnog kozjeg seruma 2 sata na sobnoj temperaturi, a zatim isprane još tri puta po 5 minuta svaki u 10% PBS.Sekcije su zatim inkubirane preko noći na 4°C u primarnim antitelima (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA) razblaženim u 1% BSA u 10% PBS.Sljedećeg dana, sekcije su isprane u 10% PBS 30 minuta na 4°C, zatim 3 puta po 5 minuta u 10% PBS i inkubirane sa sekundarnim antitijelom (Alexa Fluor 594 kozji anti-kunić, crveni konjugat, 1:500 ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) na sobnoj temperaturi 2 sata.Nakon 3 dodatna ispiranja u 10% PBS-u u trajanju od 5 minuta, sekcije su stavljene na stakalce i zapečaćene Fluoromount-G (Invitrogen).Pogledajte reprezentativne slike imunološkog bojenja na slici 3G.
Fluorescentni mikroskop koji koristi Infinity3 digitalnu kameru (Lumenera, Ottawa, Ontario, Kanada) i svjetlosni motor (Lumencor, Beaverton, OR) spojen na Zeiss mikroskop korišten je za dobijanje slika iz svake regije mozga od interesa, uključujući dijelove koji sadrže IL bez imunofluorescencije.izvršeno kako bi se potvrdilo ispravno postavljanje mjesta uboda.Slike korišćene za brojanje ćelija dobijene su pri uvećanju od 20x.Za svaki odsječak tkiva uzmite jednu sliku sa filterom koji omogućava vizualizaciju GFP-a i jednu sliku sa filterom koji omogućava vizualizaciju Alexa Fluor crvenog konjugata u sekundarnom antitelu, a za sliku je korišten softver za snimanje (Infinity Analyze, verzija 3). preklapanje.Nabavite sve slike svih područja mozga koristeći isto vrijeme ekspozicije i postavke pojačanja.Šest pacova je isključeno iz analize jer se glavni prijenos virusa dogodio izvan IL-a (88% stopa pogađanja).Još osam štakora je isključeno jer, uprkos tome što virus napada IL, nisu pokazali dovoljnu ekspresiju GFP-a u svim ciljanim regijama mozga od interesa.Osim toga, jedan štakor je isključen zbog lošeg kvaliteta tkiva.
Podesite svjetlinu i kontrast kako biste smanjili pozadinski šum na slici J (NIH) koristeći istu proceduru za svaku sliku.Brojanje ćelija za ukupne retrogradno označene ćelije, ukupne Fos-obilježene ćelije i ukupne dvostruko označene ćelije je ručno izveo eksperimentator, koji nije identificirao životinje, koristeći dodatak za citometar Image J.Broj ćelija je normalizovan na ćelije/mm2.Da bi se analizirala ekspresija Fos u ćelijama koje projektuju IL, broj dvostruko obeleženih ćelija je normalizovan na ukupan broj retrogradno obeleženih ćelija.Za mBLA, mvHPC i pvHPC analizu, broj ćelija sa višestrukih 20x slika je sumiran i normalizovan na ćelije/mm2.Za analizu ostalih regija mozga, 20x slika ili dio 20x slike je analiziran i normaliziran na ćelije/mm2.Analiza vHPC uključila je CA1, CA2 i subdominantne vHPC regije.Slika 1 prikazuje regije mozga analizirane sa slikama koje ocrtavaju prednju-zadnju granicu ravnine.
Skraćenice i lokacija područja mozga od interesa.Objašnjenje skraćenica i lokacija regija mozga dato u rukopisu.Mapa mozga u javnom vlasništvu preuzeta iz Swanson (2004) Mapa mozga: Struktura mozga pacova, 3. izdanje, licencirano pod međunarodnom licencom Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) ./), dostupno za preuzimanje na https://larrywswanson.com.
Procenat vremena zamrzavanja je prosječan tokom perioda reprodukcije tona od 30 sekundi, isključujući međuintervale.Stope prisjećanja na izumiranje izračunate su izražavanjem procenta vremena zatamnjenja tokom prisjećanja na izumiranje kao postotka zatamnjenja tokom prva 4 pokušaja treninga za izumiranje (fade tokom četiri tona prisjećanja na izumiranje/fade tokom prva četiri tona za vježbanje izumiranja*100).Niski rezultati ukazuju na dobru fade memoriju, a visoki rezultati ukazuju na lošu fade memoriju.Pacovi su razvrstani prema rezultatu prisjećanja na izumiranje, pri čemu su pacovi u gornjoj trećini rezultata prisjećanja na izumiranje klasificirani kao "loši pacovi za izumiranje", a štakori u posljednje dvije trećine rezultata prisjećanja na izumiranje su klasificirani kao "dobri".Pacovi koji blede pamćenje.
Koriste se neparametarski testovi jer podaci često krše pretpostavke o normalnoj distribuciji i/ili homogenosti varijansi.Spearmanova korelacija ranga korištena je da se utvrdi postoji li značajna povezanost između rezultata prisjećanja na izumiranje i Fos markera i dvojnih markera u regijama mozga od interesa kod svih pacova koji su bili podvrgnuti testu prisjećanja na izumiranje.Mann-Whitney U-test je korišten da se utvrdi da li postoji razlika između dvije nezavisne grupe.Kruskal-Wallisov test se koristi za određivanje da li se 2 ili više grupa razlikuju jedna od druge, a Dunn test višestrukog poređenja se koristi kada je Kruskal-Wallisova statistika značajna.Fading tokom učenja o izumiranju je procijenjeno korištenjem ponovljenih mjera analize varijanse sa grupom kao međupredmetnim faktorom i testom kao faktorom unutar subjekta. Rezultati su smatrani značajnim kada je p < 0,05 za sve statističke testove. Rezultati su smatrani značajnim kada je p < 0,05 za sve statističke testove. Rezultati se smatraju značajnim pri p < 0,05 za sve statističke testove. Rezultati su smatrani značajnim pri p < 0,05 za sve statističke testove.当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。 Rezultati se smatraju značajnim pri p < 0,05 za sve statističke testove. Rezultati su smatrani značajnim pri p < 0,05 za sve statističke testove.
Slika 2 prikazuje eksperimentalnu vremensku liniju (Slika 2A) i distribuciju frekvencija svih pacova koji su bili podvrgnuti izumiranju (Slika 2B). Pacovi u grupama sa dobrim i lošim izumiranjem značajno su se razlikovali u ovim izračunatim rezultatima prisjećanja na izumiranje (U = 0, p < 0,001) (slika 2C). Pacovi u grupama sa dobrim i lošim izumiranjem značajno su se razlikovali u ovim izračunatim rezultatima prisjećanja na izumiranje (U = 0, p < 0,001) (slika 2C). Krisy u grupama sa dobrim i plohim ugašenim značajno se razlikuju po ovim rasčitanim pokazivačima pripominjanja ugašenja (U = 0, p <0,001) (ris. 2C). Pacovi u grupama sa dobrim i lošim izumiranjem značajno su se razlikovali u ovim izračunatim stopama prisjećanja izumiranja (U=0, p<0,001) (Slika 2C).在这些计算的灭绝回忆分数中,良好和不良灭绝组中的大鼠存在显绝回忆分数中,良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着回）（0傉（0弉（0傉（0傉 U = 0,p <0,001) (图2C, U ovim rasčitanim pokazivačima pripominjanja ugašenih krisa u grupama sa dobrim i plohim ugašenim značajno se razlikuju (U = 0, p <0,001) (ris. 2C). U ovim izračunatim stopama prisjećanja na izumiranje, pacovi u dobroj i lošoj grupi izumiranja značajno su se razlikovali (U = 0, p < 0,001) (Slika 2C).Nije bilo značajne razlike u vremenu zamrzavanja između grupa sa dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem i prisjećanjem straha tokom baznog perioda sesije uslovljenog refleksa straha (X2(2) = 2,746, p = 0,253) (Slika 2D).Osim toga, tokom prikaza prvog tona uslovljenog refleksa straha, nije bilo značajne razlike u vremenu zamrzavanja između grupa sa dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem i prisjećanjem straha (X2(2) = 1,107, p = 0,575), jer kao i tokom straha tokom drugog tona.Tokom sesije kondicioniranja, postojala je značajna razlika u vremenu zamrzavanja između grupa sa dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem i prisjećanjem straha (X2(2) = 2,214, p = 0,331) (Slika 2D).Takođe nije bilo značajne razlike u vremenu bledenja između dobrih i loših grupa za izumiranje tokom osnovnog perioda obuke o izumiranju (U = 45,00, p = 0,799) (Slika 2D). Zatim, postojao je značajan glavni efekat probnog bloka (5 tonova po bloku) na vreme provedeno na zamrzavanju tokom sesije treninga izumiranja (F (2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), što ukazuje da je došlo do učenja o izumiranju (Slika 2D ). Zatim, postojao je značajan glavni efekat probnog bloka (5 tonova po bloku) na vreme provedeno na zamrzavanju tokom sesije treninga izumiranja (F (2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), što ukazuje da je došlo do učenja o izumiranju (Slika 2D ). Zatim je primetio značajan osnovni efekat probnog bloka (5 tonova u bloku) u vreme, zadržavajući se na zamirivanju tokom vremena treninga ugašenja (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), što ukazuje na to da se obuka ugašenom proishodilo ( ris. 2D). Tada je postojao značajan glavni efekat probnog bloka (5 tonova po bloku) na vreme potrebno za zamrzavanje tokom treninga izumiranja (F(2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), što ukazuje da se odvija učenje o izumiranju (Sl. 2D). ).接下来, 在 消退 训练 期间, 试块 (每 块 5 音) 对 冻结 时间 有 显着 的 主 效应 (f (2.884,54.80) = 8.331, p <0,001), 表明 发生 了 消退 学习 (图 2D)) 。接下来, 在 消退 训练 期间, 试块 (每 块 5 音) 对 冻结 时间 有 显着 的 主 效应 (f (2.884,54.80) = 8.331, p <0,001), 表明 发生 了 消退 学习 (图 2D)) 。 Zatim, tokom vremena učenja ugašenosti, probni blokovi (5 tonova u bloku) pokazali su se značajnom osnovnom uticaju na vreme zamiranja (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), što ukazuje na to da je ugašeno učenje prošlo (ris 2D). Zatim, tokom učenja o gašenju, probni blokovi (5 tonova po bloku) imali su značajan glavni uticaj na vrijeme zatamnjenja (F(2.884, 54.80) = 8.331, p < 0.001), što ukazuje da se odvija učenje o izumiranju (Sl. 2D) .Međutim, grupa izumiranja (F(1, 19) = 3,091, p = 0,095) nije imala značajan utjecaj na vrijeme zatamnjenja tokom cijelog perioda treninga za izumiranje, a nije bilo interakcije između probnog bloka i grupe za izumiranje (F(4 , 19)).76) = 1,890, p = 0,121) (slika 2D). Tokom sesije testiranja, postojala je značajna razlika između grupa dobrog izumiranja, lošeg izumiranja i prisjećanja straha u vremenu provedenom na smrzavanju tokom osnovnog perioda (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) tako da se grupa koja se prisjeća straha značajno zamrznula više od grupe dobrog izumiranja (Mean Rank Diff. = 10,57, p = 0,017), ali ne i grupe lošeg izumiranja (Mean Rang Diff. = − 3,714, p > 0,999) (Slika 2D). Tokom sesije testiranja, postojala je značajna razlika između grupa dobrog izumiranja, lošeg izumiranja i prisjećanja straha u vremenu provedenom na smrzavanju tokom osnovnog perioda (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) tako da se grupa koja se prisjeća straha značajno zamrznula više od grupe dobrog izumiranja (Mean Rank Diff. = 10,57, p = 0,017), ali ne i grupe lošeg izumiranja (Mean Rang Diff. = − 3,714, p > 0,999) (Slika 2D).Tokom sesije testiranja, postojala je značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja i grupa koje se prisjećaju straha u vremenu provedenom na smrzavanju tokom osnovnog perioda (X2(2) = 8,569, p = 0,014), tako da se grupa koja se prisjeća straha zamrznula značajno .više, nego u grupi dobrog vymiranja (srednja raznica rangova = 10,57, p = 0,017), ali nije u grupi lošeg vymiranja (srednja raznica rangova = -3,714, p> 0,999) (ris. 2D). veći nego u grupi sa dobrim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 10,57, p = 0,017), ali ne i u grupi sa lošim izumiranjem (srednja razlika u rangu = -3,714, p > 0,999) (Slika 2D).在 测试 期间, 良好 消退组, 不良 消 退组 和 恐惧 回忆组 在 基线期 冻结 时间 存在 显着 显着 (x2 (2) = 8.569, p = 0,014), 因此 恐惧 回忆组 冻结 显着 超过 良好 的 灭绝 组（平均秩差= 10,57，p = 0,017）,但不是差的灭绝组 (平均秩差= – 3,714，p>0,99)）D（0,99%在 测试 期间, 良好 消退组, 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻结 时间 方面 恐惧 显着 差异 ((x2 (2) = 8.569, p = 0,014), 恐惧 回忆组 冻结 显着 良好 的 组 组 组 组 组组 组 组 (平均秩差= 10,57,p = 0,017)，但不是差绝组 (平均秩差= – 3,714，29p>) U toku perioda testiranja nagledala se značajna razlika između grupa sa dobrim ugašenjima, grupa sa plohim ugašenjima i grupama sa pripominjanjem straha sa tačke gledišta vremenskog zamiranja na ishodnom urovnu (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), stoga pripominjanje straha grupe se značajno češće menja , nego grupa sa dobrim vymiranjem (srednja raznica rangova = 10,57, p = 0,017), ali nije grupa sa plohim vymiranjem (srednja raznica rangova = -3,714, p> 0,999) (ris. 2D). Tokom perioda testiranja, postojala je značajna razlika između grupe sa dobrim izumiranjem, grupe sa lošim izumiranjem i grupe koja se prisjeća straha u smislu vremena zamrzavanja na početku (X2(2) = 8,569, p = 0,014), tako da se prisjećanje straha grupa se smrzava značajno češće od grupe sa dobrim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 10,57, p = 0,017), ali ne i grupa sa lošim izumiranjem (srednja razlika u rangu = -3,714, p > 0,999) (Slika 2D).Grupa sa dobrim izumiranjem, grupa sa lošim izumiranjem i grupa za prisjećanje straha također su imale značajno različita vremena zatamnjenja tokom prezentacije tona test sesije (X2(2) = 14,93, p = 0,001), tako da je grupa dobrog izumiranja imala značajno manje vrijeme.vrijeme zamrzavanja nego u grupi sa slabim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 9,286, p = 0,044) i grupi memorije straha (srednja razlika u rangu = 13,86, p = 0,001) (slika 2D).
Individualne razlike u sjećanju na izumiranje.(A) Pregled hirurških i bihevioralnih procedura.(B) Distribucija učestalosti koja pokazuje individualne razlike u nestajanju memorije.(C) Dokaz da grupe dizajnirane na osnovu izračunatih rezultata prisjećanja na izumiranje predstavljaju dva različita fenotipa.(D) Srednji postotak vremena kada se štakori smrzavaju zbog lošeg izumiranja, dobrog izumiranja i prisjećanja straha u ćelijama od 30 sekundi sesije uslovljenog refleksa straha, u tonovima 20, 30 s, kolabirali su u 5 blokova tokom sesije učenja izumiranja (4 tona) .svaki), i to u četiri tona u seansama sjećanja na blijeđenje i sjećanja na strah.Trake greške predstavljaju standardnu ​​devijaciju srednje vrijednosti. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *r < 0,05, **r < 0,01, ***r < 0,001, ****r < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05,**p < 0,01,***p < 0,001,****p < 0,0001。 *p < 0,05,**p < 0,01,***p < 0,001,****p < 0,0001。 *r < 0,05, **r < 0,01, ***r < 0,001, ****r < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001.
Retrogradni indikator je ubrizgan u IL (slika 3A) i određen je broj GFP+ ćelija duž anteriorno-posteriorne ose regiona od interesa (slika 3B-F).Postojala je značajna razlika u broju GFP+ ćelija između prednjeg, srednjeg i zadnjeg PVT (X2(2) = 8,200, p = 0,017), tako da je mPVT pokazao značajno više GFP+ ćelija nego aPVT (srednji rang) Diff.= 18,37, p = 0,035) i pPVT (srednji rang Dif. = 17,71, p = 0,045) (slika 3C).Iako nekoliko životinja nije otkrilo GFP+ ćelije u pCLA i stoga nisu mogle mapirati aktivnost u ovoj regiji, nije bilo značajne razlike između prednjeg, srednjeg i stražnjeg CLA (X2(2) = 5,596, p = 0,061).Broj GFP+ ćelija (slika 3D).Zatim, pošto su neke GFP+ ćelije pronađene u aBLA ili avHPC kod nekoliko pacova, analizirani su samo srednji i zadnji deo ovih područja.Srednji i zadnji BLA (U=393, p=0,009) značajno su se razlikovali u broju GFP+ ćelija, tako da je pBLA pokazao više IL projekcija od mBLA (Slika 3E).Slično, postojala je značajna razlika između srednjih i stražnjih vHPC, tako da su pvHPCs pokazivale više IL projekcija nego mvHPC (U = 403,5, p = 0,014) (Slika 3F).Slika 3G je primjerna slika koja prikazuje Fos, aavRG-GFP i dvostruko označene ćelije.
Kvantifikujte IL aferente u cijeloj regiji mozga koja vas zanima.(A) Šematski prikaz distribucije aavRG-CAG-GFP u cijelom IL pacova.(B) Reprezentativne slike retrogradnih markera na različitim anteroposteriornim lokacijama u interesnoj regiji mozga.Kvantifikacija retrogradnog označavanja duž anteroposteriorne ose (C) paraventrikularnog talamusa, (D) klavikule, (E) bazolateralnog krajnika i (F) ventralnog hipokampusa.(G) Reprezentativne slike koje prikazuju retrogradno aavRG označavanje, Fos označavanje i dvostruko aavRG i Fos označavanje u aPVT.Trake greške predstavljaju standardnu ​​devijaciju srednje vrijednosti. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *r < 0,05, **r < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *r < 0,05, **r < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.Skala bar 100 µm.Mapa mozga u javnom vlasništvu na panelu A je reprodukovana iz Swansonove (2004.) Mapa mozga: struktura mozga pacova, 3. izdanje, licencirano pod međunarodnom licencom Creative Commons Attribution-NonCommons 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc )./4.0/) dostupno za preuzimanje na https://larrywswanson.com.
Globalna i IL projekcija specifična Fos aktivnost je analizirana u aPVT, mPVT i pPVT kod svih pacova.Nije bilo značajne razlike između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i grupa kućnih ćelija u ekspresiji Fos u aPVT (X2(3) = 3,888, p = 0,274) (Slika 4A), niti je postojala značajna korelacija između Fos u aPVT između ekspresije i opoziva ekstinkcije (rs = 0,092, p = 0,691) (slika 4B) ili između ekspresije Fos u aferentima aPVT IL i prisjećanja na izumiranje (rs = 0,143, p = 0,537) (slika 4D).Međutim, u aPVT IL aferentima, ekspresija Fos se značajno razlikovala između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i grupa kućnih ćelija (X2(3) = 15,05, p = 0,002), tako da je grupa koja se prisjeća straha pokazala relativno dobro izumiranje.grupe regresije (srednja razlika u rangu = 11,54, p = 0,003), loša regresija (srednja razlika u rangu = 10,57, p = 0,034) i kućne ćelije (srednja razlika u rangu = 12,79, p = 0,005) (slika 4C).Nadalje, nije bilo značajne razlike između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i grupa kućnih ćelija za ekspresiju Fos u mPVT (X2(3) = 2,272, p = 0,518) (slika 4E) i za ekspresiju Fos u mPVT..Značajna korelacija sa opozivom izumiranja (rs = 0,168 p = 0,468) (Slika 4F).Iako je postojala značajna razlika između grupa dobrih, loših, prisjećanja straha i kućnih ćelija u ekspresiji Fos u IL aferentnim mPVT ćelijama (X2(3) = 9,252, p = 0,026), post hoc poređenje nije otkrilo nijednu ili dvije.Značajne razlike između grupa (Slika 4G).Nadalje, nije postojala značajna korelacija između ekspresije Fos u IL-aferentnim mPVT ćelijama i opoziva izumiranja (rs = 0,174, p = 0,450) (Slika 4H). Zatim, postojala je značajna razlika između grupa dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i kućnog kaveza u Fos ekspresiji u pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), tako da je grupa dobrog izumiranja (srednji rang Dif. = 14,96, p = 0,010), ali ne i loše izumiranje (Mean Rank Diff. = 12,86, p = 0,113) ili grupa prisjećanja straha (Mean Rank Diff. = 2,571, p > 0,999), pokazuju više Fos izraza od kućna kavezna grupa (slika 4I). Zatim, postojala je značajna razlika između grupa dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i kućnog kaveza u Fos ekspresiji u pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), tako da je grupa dobrog izumiranja (srednji rang Dif. = 14,96, p = 0,010), ali ne i loše izumiranje (Mean Rank Diff. = 12,86, p = 0,113) ili grupa prisjećanja straha (Mean Rank Diff. = 2,571, p > 0,999), pokazuju više Fos izraza od kućna kavezna grupa (slika 4I). Dalje, nagledala se značajna razlika između grupa sa dobrim ugašenjima, plohim ugašenjem, kritikom straha i domaće kletke u ekspresiji Fos u pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), tako što je grupa sa dobrim ugašenjima (srednji rang Dif. = 14,96, p = 0,010), ali nije u grupi lošeg ugašenja (srednja rangova razlika = 12,86, p = 0,113) ili grupa vospominaj o strahu (srednja rangova stranica = 2,571, p > 0,999), demonstrirala se više vyražennaâ ékspressiâ Fos, nego u grupi gruppa domaćih ćelija (ris. 4I). Nadalje, postojala je značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i grupa kućnih ćelija u ekspresiji Fos u pPVT (X2(3)=13,89, p=0,003), tako da je grupa dobrog izumiranja (srednji rang Dif. = 14,96, p = 0,010), ali ne u grupi sa lošim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 12,86, p = 0,113) ili u grupi memorije straha (srednja razlika u rangu = 2,571, p > 0,999), pokazali su izraženiji Fos izraz nego u grupi grupa kućnih ćelija (slika 4I).其次, PPVT 中 FOS 表达 好 消, 差消, 恐惧 和 家笼组 之间 存在 显着 差异 (x2 (3) = 13,89, p = 0,003) 使得 消组 ((srednja rang difff.= 14.96, p = 0,010), 但 不 是 较 差 的 消退 (srednja rang razl. = 12,86, p = 0.113) 或 恐惧 回忆组 (srednja rang razl. = 2.571, p> 0.999), 比 家庭 笼组 (比 家庭 家庭 (比 家庭 家庭 (比 家庭 笼组 (比 家庭 笼组 (比 家庭 家庭 (比 家庭 家庭 (比 家庭 家庭 (比 家庭 家庭 (比 家庭 家庭 (比 家庭家庭) ）.= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退 (srednja razlika ranga = 12,86, p = 0,113) ）。Drugo, postojale su značajne razlike u ekspresiji Fos-a u pPVT-u između dobrih, loših, prisjećanja straha i grupa kućnih ćelija (X2(3) = 13,89, p = 0,003), čineći grupu dobrog unosa (srednja razlika u rangu = 14,96)., p = 0,010), no ne huže po ugašeniju (srednja raznica rangov = 12,86, p = 0,113) ili grupa otzyva straha (srednja raznica rangov = 2,571, p > 0,999), nego u grupi domaće ćelije (ris. 4I) . , p = 0,010), ali nije lošiji u izumiranju (srednja razlika u rangu = 12,86, p = 0,113) ili grupi prisjećanja straha (srednja razlika u rangu = 2,571, p > 0,999) od grupe kućnih ćelija (Slika 4I)..Međutim, nije bilo značajne korelacije između ekspresije pPVT Fos i prisjećanja na izumiranje (rs = 0,051, p = 0,825) (Slika 4J).Konačno, postojala je značajna razlika u ekspresiji Fos u aferentima pPVT IL između grupa sa dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem, pamćenjem straha i u kućnim ćelijama (X2(3) = 12,34 p = 0,006), tako da je dobra ekspresija Fos u IL- bila lošiji nego u grupama izumiranja (srednja razlika u rangu = 12,54, p = 0,014) i u matičnoj ćeliji (srednja razlika u rangu = 12,89, p = 0,049) (slika 4K) i značajno korelira sa aferentima IL unutar pPVT-a između aktivacije i opoziv izumiranja, bolje prisjećanje izumiranja je povezano sa većom aktivacijom ovih IL aferenata (rs = -0,438, p = 0,047) (Slika 4L).
Fos aktivnost je povećana u IL aferentima zadnjeg paraventrikularnog talamusa (PVT) kod pacova, što je pokazalo dobru regresiju.(A) Nije bilo značajnih razlika između grupa u ekspresiji Fos u aPVT.(B) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i opoziva izumiranja u aPVT.(C) Grupa koja se prisjeća straha pokazala je povećanu ekspresiju Fos u aferentima IL u poređenju sa svim ostalim grupama.(D) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u aferentima IL i opoziva izumiranja u aPVT.(E) Nije bilo značajnih međugrupnih razlika u ekspresiji Fos u mPVT.(F) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i memorije na izumiranje u mPVT.(G) Ekspresija Fos u aferentnim IL ćelijama u mPVT nije se značajno razlikovala između grupa.(H) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u aferentima IL i opoziva izumiranja u mPVT.(I) Dobro izumrla grupa, ali nijedna druga grupa, pokazala je povećanu Fos aktivnost u pPVT u poređenju sa grupom u kućnom kavezu.(J) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i opoziva izumiranja u pPVT.(K) Grupa sa dobrim izumiranjem pokazala je povećanu ekspresiju Fos u aferentnim ćelijama IL u poređenju sa grupom sa slabim izumiranjem i grupom kućnih ćelija.(L) Postoji značajna korelacija između ekspresije Fos u IL aferentima i prisjećanja na izumiranje, tako da je dobro prisjećanje izumiranja povezano s većom ekspresijom Fos u aferentima IL.Trake greške predstavljaju standardnu ​​devijaciju srednje vrijednosti. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *r < 0,05, **r < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *r < 0,05, **r < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.
Zatim je analizirana globalna i IL projekcija Fos aktivnost u aCLA i mCLA pacova u svim grupama. Postojala je značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i grupa kućnog kaveza u Fos ekspresiji u aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036) tako da je grupa koja se prisjeća straha (Mean Rank Diff. = 14,50, p = 0,049), ali ni grupe siromašnih (srednja razlika ranga = 10,21, p = 0,373) ni dobrog izumiranja (srednja razlika ranga = 4,607, p > 0,999) nisu pokazale više Fos ekspresije od grupe kućnog kaveza ( Slika 5A). Postojala je značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i grupa kućnog kaveza u Fos ekspresiji u aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036) tako da je grupa koja se prisjeća straha (Mean Rank Diff. = 14,50, p = 0,049), ali ni grupe siromašnih (srednja razlika ranga = 10,21, p = 0,373) ni dobrog izumiranja (srednja razlika ranga = 4,607, p > 0,999) nisu pokazale više Fos ekspresije od grupe kućnog kaveza ( Slika 5A). Među grupama sa dobrim ugašenjima, plohim ugašenjima, pripominjanjem straha i domaćim kletkama nazvali su značajnu stranicu u ekspresiji Fos u aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), tako što je grupa pripominjanja straha (srednje rangove razlike = 14,50, p = 0,049), no ni ploha (srednja rangova raznica = 10,21, p = 0,373), ni grupa sa dobrim vymiranjem (srednja rangova raznica = 4,607, p > 0,999) nije demonstrirala više ekspresije Fos, nego grupa u domaćem kletku ( Ris 5A). Postojala je značajna razlika u ekspresiji aCLA Fos između grupa dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i grupa kućnih ćelija (X2(3) = 8,455, p = 0,036), tako da je grupa koja se prisjeća straha (srednja razlika u rangu = 14,50, p = 0,049), ali ni loša (srednja razlika u rangu = 10,21, p = 0,373) ni dobra grupa izumiranja (srednja razlika u rangu = 4,607, p > 0,999) nisu pokazale više Fos ekspresije od grupe kućnih ćelija (slika .5A) . ACLA 中 FOS 表达 的 良好 消退, 消退差, 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 和 (X2 (3) = 8.455, P = 0.036), 因此 恐惧 回忆组 (srednja rang razl. = 14,50, P = 0.049), 但 无论是 差 (平均 秩差 = 10.21, P = 0.373) 还是 良好 灭绝 (平均 秩差 = 4.607, P> 0.999) 组, 都 显示 出 比 家庭 笼组 更 的 FOS 表达 (图 5a) 。 ACLA 中 FOS 表达 的 消退, 消退差, 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 差异 差异 差异 差异 (x2 (3) = 8.455, p = 0,036), 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 (znači Rang razl. = 14.50, p = p = p = p = p = p = p = p = p = p = 14. 0.049), 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10.21, p = 0.373) 良好 灭绝 (平均 秩差 秩差 = 4.607, p> 0,999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Bila značajna raznica između grupa sa dobrim ugašenjima, plohim ugašenjem, kritikom straha i domaćom kletom po ekspresiji Fos u aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), stoga grupa recenzija straha (srednje rangiranje = 14,50) , p = 0,049), ali grupe sa plohima (srednja raznica rangova = 10,21, p = 0,373) i dobro vymiranim (srednja raznica rangova = 4,607, p > 0,999) pokazuju veću domaću ekspresiju Fos, od grupe sa kletom (ris. 5A). Postojala je značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i grupa kućnih ćelija u aCLA Fos ekspresiji (X2(3) = 8,455, p = 0,036), tako da grupa koja se prisjeća straha (srednja razlika u rangu = 14,50), p = 0,049 ), ali grupe sa lošim (srednja razlika u rangu = 10,21, p = 0,373) i dobrim izumiranjem (srednja razlika ranga = 4,607, p > 0,999) pokazale su veću ekspresiju Fos od grupe kućnih ćelija (Slika 5A). .Nije bilo značajne korelacije između globalne ekspresije Fos u (rs = 0,036, p = 0,876) (Slika 5B) ili ekspresije Fos u IL aCLA aferentnim ćelijama (rs = -0,282, p = 0,215) i prisjećanja na izumiranje (Slika 5B)..5D), takođe nije bilo značajne razlike između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i grupa kućnih ćelija u ekspresiji Fos u aCLA IL aferentima (X2(3) = 6,722, p = 0,081) (Slika 5C)..). Zatim, postojala je značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i grupa kućnog kaveza u Fos ekspresiji u mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) tako da je grupa dobrog izumiranja (Mean Rank Diff) . = 12,93, p = 0,038), ali ni loše izumiranje (srednja razlika u rangu = 5,143, p > 0,999) niti grupe koje se prisjećaju straha (srednja razlika ranga = 14,00, p = 0,063) nisu pokazale značajno više Fos ekspresije u mCLA u odnosu na grupu kućnih kaveza (slika 5E). Zatim, postojala je značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i grupa kućnog kaveza u Fos ekspresiji u mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) tako da je grupa dobrog izumiranja (Mean Rank Diff) . = 12,93, p = 0,038), ali ni loše izumiranje (srednja razlika u rangu = 5,143, p > 0,999) niti grupe koje se prisjećaju straha (srednja razlika ranga = 14,00, p = 0,063) nisu pokazale značajno više Fos ekspresije u mCLA u odnosu na grupu kućnih kaveza (slika 5E). Zatim je primetila značajnu raznicu između grupa sa dobrim ugašenjima, plohim ugašenjima, pominjanjima o strahu i domaćoj kletki u ekspresiji Fos u mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), tako što je grupa sa dobrim ugašenjem (srednja raznica rang . = 12,93, p = 0,038), no ni grupe lošeg ugašenja (srednja rangova razlika = 5,143, p > 0,999), ni grupa kritika straha (srednja rangova razlika = 14,00, p = 0,063) nisu pokazale znatno više ékspressii Fos u mCLA. Tada je postojala značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, sjećanja na strah i grupa kućnih ćelija u ekspresiji mCLA Fos (X2(3) = 10,12, p = 0,018), tako da je grupa dobrog izumiranja (srednja razlika rang = 12,93, p = 0,038), ali ni grupe sa lošim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 5,143, p > 0,999) ni grupe za prisjećanje na strah (srednja razlika u rangu = 14,00, p = 0,063) nisu pokazale značajno veću ekspresiju Fos u mCLA.u poređenju sa grupom kućnih kaveza (Slika 5E).接下来, 在 Mcla 中 的 FOS 表达, 良好 消退组, 不良 消 退组, 恐惧 回忆组 家庭 笼组 之间 显着 差异 (x2 (3) = 10,12, p = 0,018), 良好 (((((((((( （（（ Razlika srednjeg ranga .= 12.93, p = 0,038), 但 在 Mcla 中, 弱消退 (平均 秩差 = 5.143, p> 0.999) 和 恐惧 回忆组 (平均 秩差 = 14,00, p = 0,063) 均 未 显示 出 更 多 的 FOS 表达 表达相对于家庭笼组 (图5E)。 = 12.93, p = 0,038), 在 在 Mcla 中, 弱消退 (平均 秩差 秩差 秩差 = 5.143, p> 0.999) 和 回忆组 (平均 秩差 = 14,00, p = 0,063) 未 显示 出 更 多 的 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组 (图5E）。). Dalje, u ekspresiji Fos-a u mCLA-u posmatrala značajna razlika između grupa sa dobrim ugađanjem, grupa sa plohim ugasanjem, grupa sa kritikama o strahu i grupama domaće mreže (X2(3) = 10,12, p = 0,018), tako, grupa dobrog ugašeniâ (srednja raznost rangov = 12,93, p = 0,038), ali u mCLA ni slabo ugašenje (srednja raznica rang = 5,143, p > 0,999), ni grupa recenzija straha (srednja raznica rang = 14,00, p = 0,999) = 0,063) pokazao je sjajnu ekspresiju Mnogo Fos u odnosu na grupu sa domaćom kletko (Risunok 5E). Nadalje, postojala je značajna razlika u ekspresiji Fos u mCLA između grupe sa dobrim izumiranjem, grupe sa lošim izumiranjem, grupe sa povratnom informacijom o strahu i grupe kućnih ćelija (X2(3) = 10,12, p = 0,018), tako da je dobro izumiranje (srednja razlika u rangu = 12,93, p = 0,038), ali u mCLA ni slabo izumiranje (srednja razlika u rangu = 5,143, p > 0,999) ni grupa prisjećanja na strah (srednja razlika u rangu = 14,00, p = 0,993) = 0,06 nisu pokazala bolje rezultate. Multi Fos ekspresija u poređenju sa grupom kućnih ćelija (Slika 5E).Međutim, globalna ekspresija Fos u mCLA (rs = 0,321, p = 0,156) (slika 5F) ili u aferentnim IL mCLA ćelijama (rs = -0,121, p = 0,602) i opoziv izumiranja (slika 5H), nema značajne razlike između grupe sa dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem, prisjećanjem straha i kućnom ćelijom za ekspresiju Fos u aferentnim ćelijama IL mCLA (X2(3)=4,923, p=0,178) (Slika 5G).
Fos aktivnost je bila povišena u sredini klaustruma kod pacova sa dobrom memorijom na izumiranje.(A) Grupa koja se prisjeća straha, ali ne i druge grupe, pokazala je povećanu Fos aktivnost u poređenju sa grupom kućnih ćelija u aCLA.(B) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u aCLA i prisjećanja na izumiranje.(C) Ekspresija Fos u IL aferentnim aCLA ćelijama nije se značajno razlikovala između grupa.(D) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u aferentima IL i opoziva izumiranja u aCLA.(E) Grupa koja je dobro izumrla, ali ne i druge grupe, pokazala je povećanu Fos aktivnost u mCLA u poređenju sa grupom kućnih ćelija.(F) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i opoziva izumiranja u mCLA.(G) Ekspresija Fos u aferentnim ćelijama IL mCLA nije se značajno razlikovala između grupa.(H) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u aferentima IL i opoziva izumiranja u mCLA.Trake greške predstavljaju standardnu ​​devijaciju srednje vrijednosti. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05.
Zatim je analizirana globalna i IL projekcija specifična Fos aktivnost u mBLA i pBLA u svim grupama pacova.Nije bilo značajne razlike između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i grupa kućnih ćelija u ekspresiji Fos u mBLA (X2(3)=0,944, p=0,815) (Slika 6A).Takođe nije bilo značajne razlike između grupa sa dobrom regresijom, lošom regresijom, prisjećanjem straha i ekspresijom Fos-a kućne ćelije u aferentnim ćelijama IL mBLA (X2(3)=0,518, p=0,915) (Slika 6C).Osim toga, nije postojala značajna korelacija između globalne ekspresije Fos u mBLA (rs = 0,126, p = 0,588) (Slika 6B) i ekspresije Fos u IL mBLA aferentnim ćelijama (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p = 0,385).p = 0,385).Slika 6D) i opoziv izumiranja.Takođe nije bilo značajne razlike u dobrom izumiranju, lošem izumiranju, pamćenju straha i grupama kućnih ćelija u ekspresiji Fos u pBLA (X2(3) = 4,246, p = 0,236) (slika 6E), a takođe nije bilo značajne razlike u pBLA Dobro.izumiranje, slabo izumiranje, prisjećanje straha i kućne ćelijske grupe u ekspresiji Fos u aferentnim ćelijama IL (X2(3)=1,954, p=0,582) (Slika 6G).Konačno, globalna ekspresija Fos u pBLA (rs = 0,070, p = 0,762) (slika 6F) i ekspresija Fos u pBLA IL aferentnim ćelijama (rs = 0,122, p = 0,597) i opoziv izumiranja (slika 6H).
Individualne razlike u reprodukciji izumiranja nisu mapirane s razlikama u ekspresiji Fos u bazolateralnoj amigdali.(A) Nije bilo značajnih međugrupnih razlika u ekspresiji Fos u mBLA.(B) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i prisjećanja na izumiranje u mBLA.(C) Ekspresija Fos u aferentnim ćelijama IL mBLA nije se značajno razlikovala između grupa.(D) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u aferentnim ćelijama IL i opoziva izumiranja u mBLA.(E) Nije bilo značajnih međugrupnih razlika u ekspresiji Fos u pBLA.(F) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i opoziva izumiranja u pBLA.(G) Ekspresija Fos u aferentnim IL pBLA ćelijama nije se značajno razlikovala između grupa.(H) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u aferentnim ćelijama IL i opoziva izumiranja u pBLA.Trake greške predstavljaju standardnu ​​devijaciju srednje vrijednosti.
Konačno, globalna i IL projekcija specifična Fos aktivnost je analizirana u mvHPC i pvHPC kod svih pacova. Postojala je značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i grupa kućnog kaveza u Fos ekspresiji u mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) tako da je dobro izumiranje (srednja razlika ranga = 13,29 , p = 0,031), ali ni slabo izumiranje (srednja razlika ranga = 6,857, p > 0,999) ni prisjećanje straha (srednja razlika ranga = 8 000, p = 0,864) nisu pokazale više Fos ekspresije od grupe u kućnom kavezu (Sl. 7A). Postojala je značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i grupa kućnog kaveza u Fos ekspresiji u mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) tako da je dobro izumiranje (srednja razlika ranga = 13,29 , p = 0,031), ali ni slabo izumiranje (srednja razlika ranga = 6,857, p > 0,999) ni prisjećanje straha (srednja razlika ranga = 8 000, p = 0,864) nisu pokazale više Fos ekspresije od grupe u kućnom kavezu (Sl. 7A). Između grupa sa dobrim ugašenjima, plohim ugašenjima, ocenama straha i kućnim ćelijama posmatrali su značajnu stranicu u ekspresiji Fos u mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), tako što je dobro ugađanje (srednja rangova razlika = 13,29) , p = 0,031), ali nisam u grupi sa plohim ugasanjem (srednja rangova grupa = 6,857, p > 0,999), ni u grupi sa kritikom straha (srednja rangova grupa = 8,000, p = 0,864) ekspresija Fos je bila iznad, nego u grupi sa domaćom kletkoj (ris. 7A). Postojala je značajna razlika u ekspresiji mvHPC Fos između grupa sa dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem, prisjećanjem straha i kućnim ćelijama (X2(3) = 8,056, p = 0,045), tako da je dobro izumiranje (srednja razlika u rangu = 13,29), p = 0,031), ali ni u grupi sa lošim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 6,857, p > 0,999) niti u grupi sa prisjećanjem straha (srednja razlika u rangu = 8 000, p = 0,864) Fosova ekspresija nije bila veća nego u domaćoj grupi.ćelija (slika 7A). MVHPC 中 FOS 表达 的 良好 消退, 不良 消退, 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 (x2 (3) = 8.056, p = 0,045), 因此 良好 消退 (平均 秩差 = 13.29), P = 0,031 ), 但 无论是 弱消退 (平均 秩差 = 6.857, p> 0.999) 还是 恐惧 回忆 (平均 秩差 = 8.000, p = 0.864) 组都 显示 出 比 家庭 笼组 更 多 的 FOS 表达 (图 2). MVHPC 中 FOS 表达 的 消退, 不良 消退 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 ((x2 (3) = 8.056, p = 0,045), 良好 ((平均 秩差 秩差 = 13.29) P = 0.031) , 但 无论是 弱消退 (平均 秩差 秩差 = 6.857, p> 0.999) 还 是 恐惧 (平均 秩差 秩差 = 8.000, p = 0.864) 组 都 出 家庭 笼组 多 的 FOS 表达 图 图 .... ) Imelasʹ značitelʹnaâ raznica između grupa «dobro», «ploho», «pripominanie straha» i «domaća ćelija» za ekspresiju Fos u mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) i, sledstveno, dobra regresija (srednja raznica rangov = 13,29), p = 0,031), no grupe sa slabim ugasanjem (srednja raznica rangova = 6,857, p > 0,999) i pominjanja o strahu (srednja raznica rangova = 8 000, p = 0,864) pokazuju više višu ekspresiju Fos, od grupe u domašnej kletke (ris. 2). Postojala je značajna razlika između dobrog, lošeg, prisjećanja straha i grupa kućnih ćelija za ekspresiju Fos u mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) i stoga dobra regresija (srednja razlika u rangu = 13,29), p = 0,031), ali grupe sa slabim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 6,857, p > 0,999) i pamćenjem straha (srednja razlika u rangu = 8 000, p = 0,864) pokazale su veću ekspresiju Fosa od grupe u kućnom kavezu (Sl. 2).7A).Međutim, nije bilo značajne razlike (X2(3) = 4,893, p = 0,180) (Slika 7C).Osim toga, nije postojala značajna korelacija između globalne ekspresije Fos u mvHPC (rs = -0,233, p = 0,309) (Slika 7B) i ekspresije Fos u mvHPC aferentnim IL ćelijama (rs = 0,056, p = 0,810) (Slika 7D).i izvještaj o nestanku.Nadalje, nije bilo značajne razlike između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i grupa kućnih ćelija u ekspresiji Fos u pvHPC (X2(3) = 3,623, p = 0,353) (Slika 7E), i nije bilo značajnih razlika.razlika u dobroj regresiji ekspresije Fos u pvHPC aferentnim IL ćelijama, lošoj regresiji, pamćenju straha i kućnim grupama ćelija (X2(3)=3,871, p=0,276) (Slika 7G).Konačno, nije bilo značajne korelacije između pvHPC globalne Fos ekspresije (rs = -0,127, p = 0,584) (Slika 7F) i ekspresije Fos u IL-aferentnim pvHPC ćelijama (rs = 0,176, p = 0,447) i prisjećanja na izumiranje (Slika 7F ).7H).
Ekspresija Fos-a je povišena u ventralnom hipokampusu pacova, što ukazuje na dobro izumiranje pamćenja.(A) Grupa koja je dobro izumrla, ali ne i druge grupe, pokazala je povećanu ekspresiju Fos u mvHPC u poređenju sa grupom kućnih ćelija.(B) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i prisjećanja na izumiranje u mvPHC.(C) Ekspresija Fos u mvHPC aferentnim IL ćelijama nije se značajno razlikovala između grupa.(D) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u aferentima IL i opoziva izumiranja u mvHPC.(E) Nije bilo značajnih razlika između grupa u ekspresiji Fos u pvHPC.(F) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i opoziva izumiranja u pvHPC.(G) Ekspresija Fos u pVHPC aferentnim IL ćelijama nije se značajno razlikovala između grupa.(H) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u aferentima IL i opoziva izumiranja u pvHPC.Trake greške predstavljaju standardnu ​​devijaciju srednje vrijednosti. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05.Naša primarna analiza za sve regije pokazala je poređenje na tri nivoa duž anteroposteriorne ose, iako smo analizirali i svaku regiju koja je kolabirala duž anteroposteriorne ose.Rezultati ovih analiza prikazani su u tabeli 1.
Ovdje smo testirali hoće li se individualne razlike u prisjećanju izumiranja odraziti na različite obrasce aferentne aktivnosti u donjem limbičkom korteksu.U tu svrhu, procijenili smo Fos aktivnost u IL projekcijama iz paraventrikularnog talamusa, klaustruma, bazolateralnog krajnika i ventralnog hipokampusa nakon ponavljanja izumiranja.U ćelijama koje projiciraju IL, pronašli smo veću aktivnost u stražnjem dijelu PVT-a kod pacova koji su pokazali dobro pamćenje izumiranja u poređenju sa pacovima sa lošim izumiranjem.Nije bilo razlika u aferentima IL od klavikularnog jezgra, ventralnog hipokampusa ili bazolateralnog krajnika.Pored ćelija koje projektuju IL, uočena je povećana neuralna aktivnost u odabranim područjima klaustruma štakora i ventralnog hipokampusa sa dobrom rezolucijom.Naši rezultati pokazuju da je uspješna memorija izumiranja organizirana specifičnim PVT projekcijama na IL i ćelije koje ne ciljaju na IL u klaustrumu i ventralnom hipokampusu.
Otkrili smo da je predviđanje PVT IL bilo aktivno kod pacova koji su pokazali dobro prisjećanje na izumiranje, što je u skladu s nedavnom studijom koja pokazuje da je PVT potreban za prisjećanje na izumiranje.Ova studija nije koristila manipulacije specifične za podregije, ali je pokazala da su i PVT projekcije na lateralnoj centralnoj amigdali i IL projekcije na PVT bile potrebne za reprodukciju izumiranja.Naši rezultati ukazuju na to da, pored lanca IL-PVT-CeL, ulazak nakon PVT-a u IL može biti potreban i za opoziv gašenja.Dakle, ispada da su i eferentne i aferentne IL veze uključene u reprodukciju izumiranja.Važan sljedeći korak je utvrditi šta uzrokuje pPVT da signalizira reprodukciju izumiranja na nivou neuronskog kola.Pored odnosa sa IL, prethodne studije praćenja kanala31,32 su pokazale da pPVT prima ulaz od ventralnog periakveduktalnog sivog (vPAG), što je povezano sa učenjem o izumiranju33,34,35,36.Iako uloga vPAG-a u opozivu izumiranja nije utvrđena, predviđanje pPVT-a pomoću vPAG-a je atraktivan kandidat zbog njihove gustine i uključenosti oba regiona u generisanje prethodnih dokaza o izumiranju straha.
Još jedan važan aspekt naših PVT rezultata je da su specijalizirani duž svoje prednje-posteriorne ose.Zapanjujuće, neuronska aktivnost PVT projekcije u IL korelira sa suprotnim stanjem ponašanja, tako da je aktivnost pre-PVT projekcije u IL povezana sa prisjećanjem straha, dok je pPVT projekcija aktivna nakon uspješnog izumiranja prisjećanja (tj. straha).Ova funkcionalna heterogenost unutar PVT-a nije iznenađujuća s obzirom na prethodni rad [obrađeno u 37].Upečatljiv primjer funkcionalne distribucije u PVT-u nedavno se pojavio u studiji koja je karakterizirala svojstva specifičnih tipova ćelija u PVT-u.Ova studija pokazuje da se ćelije dopamina koje eksprimiraju DRD2 pretežno eksprimiraju u pPVT, inerviraju korteks prednjih ekstremiteta i reaguju na averzivne stimuluse.Druga ćelijska populacija je pretežno izražena u aPVT i označava prijelaz u stanje niske fiziološke uzbuđenosti i inervira korteks donjih udova.Naši rezultati se teško uklapaju u ovaj obrazac, jer su aPVT ćelije koje projiciraju IL aktivne tokom prisjećanja straha, dok su pPVT projekcije aktivne i životinje pokazuju nizak nivo straha.Postoje najmanje dva moguća objašnjenja za očigledno neslaganje.Prvo, identifikovani tipovi ćelija nisu locirani isključivo na jednom prednje-posteriornom mestu TVV.Dakle, aktivne pPVT ćelije koje projiciraju IL kod pacova sa dobrom memorijom na izumiranje mogu pripadati klasi ćelija za koje je vjerojatnije da će biti otkrivene u aPVT i signaliziraju prijelaz u stanje niske uzbuđenosti.Isto može važiti i za ćelije koje projiciraju IL u aPVT aktiviranom nakon pamćenja straha.Drugo, prethodne studije praćenja su identifikovale prisustvo pPVT-ova koji projektuju IL3, iako se čini da su neki izvedeni iz ćelija koje sadrže DRD2, drugi tipovi ćelija mogu da projektuju na IL i da se aktiviraju nakon uspešne reprodukcije gašenja.
Iako je cilj ove studije bio da se identifikuju razlike između štakora koji pokazuju različite fenotipove izumiranja, ovi eksperimenti su takođe otkrili nove podatke vezane za mehanizme pamćenja straha.Zanimljivo je da smo otkrili povećanu Fos aktivnost na prednjoj CLA kod pacova sa pamćenjem na strah.
Ključna kost je pozicionirana kao centar kortikalne komunikacije i uključena je u procese u rasponu od senzorne integracije do pažnje i sna40,41,42,43.Postoje ograničeni dokazi o tome kako je klaustrum uključen u uslovljavanje straha ili izražavanje straha, međutim, ranija istraživanja su pokazala da je kontekstualno izražavanje straha uključeno u Fos aktivnost u klaustrumu.Nedavno je objavljeno da inhibicija projekcija atrezije na entorhinalni korteks tokom kontekstualnog uslovljavanja strahom narušava formiranje dugoročne memorije, iako njihova potreba za izražavanjem straha nije testirana.U istoj studiji, uočena je povećana aktivacija Fosa kada su životinje bile izložene novom okruženju u poređenju s miševima izloženim poznatom okruženju.Imajući ovo na umu, CLA aktivacija o kojoj ovdje izvještavamo može biti posljedica izlaganja novoj kameri tokom testiranja, a ne straha od samog povlačenja.Da bi se preciznije okarakterizirala funkcija brava u obradi straha i situacije, buduće studije bi trebale koristiti ciljanu manipulaciju bravama.
Iako je prethodni rad pokazao da je PVT povezan s izražavanjem pamćenja straha,45,46,47 nismo primijetili nikakvu promjenu u ukupnoj ekspresiji Fos kod pacova kada su se prisjetili straha 48 sati nakon kondicioniranja.Ova razlika se može objasniti s nekoliko faktora, uključujući prethodno radno testiranje straha od diskretnih znakova u istom kontekstu u kojem se odvijalo kondicioniranje, dok je u našem eksperimentu testiranje rađeno u novoj prostoriji.Osim toga, eutanazirali smo naše životinje 60 minuta nakon testiranja, dok je prethodni rad koristio vremensku tačku od 90 minuta.Konačno, u prethodnim studijama, test je rađen u prostoriji u kojoj su životinje mogle reagovati apetitom, dok su u našem radu pacovi testirani bez reakcije na apetit.Iako ovo dozvoljava određeni stepen uslovljene inhibicije, postoje dokazi da dozvoljavanje životinjama da inhibiraju pritisak da dobiju hranu dok testiraju da li se plaše znakova stvara motivacioni sukob (tj. strah naspram nagrade), što je ključni stimulativni faktor.učešće PVT48, 49. .
Poznato je da je bazolateralna amigdala uključena u stjecanje izumiranja straha50,51 i postoje dokazi da su BLA projekcije na IL također uključene u ovaj proces23.Međutim, nije jasno da li su BLA i njene veze uključene u povratak izumiranja.Studije snimanja23,28 pokazale su povećanu aktivnost BLA kod životinja koje se prisjećaju izblijedjelih sjećanja.Dok naš prethodni rad nije pokazao razliku u aktivaciji BLA između dobrog i lošeg izumiranja štakora, naši rezultati ovdje sugeriraju da opoziv izumiranja općenito ne utječe na BLA ili aktivaciju u predviđanju BLA IL.U skladu s našim nalazima, iako studije manipulacije kola sugeriraju da su IL ulazi u BLA važni za učenje o izumiranju, oni nisu neophodni za prisjećanje na izumiranje.Međutim, uloga BLA se ne može potpuno zanemariti jer nedavni dokazi sugeriraju da su određeni tipovi ćelija u BLA potrebni za reprodukciju izumiranja.
Značajno je da prisjećanje straha nije rezultiralo aktivacijom Fos-a u BLA, jer su prethodne studije lezija, lijekova i imidžinga implicirale ovo područje u izražavanju straha i/ili ponovnom konsolidaciji straha nakon izvlačenja54,55,56,57.Podaci prikazani ovdje kombinuju bazalni i lateralni subnukleus amigdale, a prethodni podaci sugeriraju da izraz straha pokreće Fos aktivnost na dorzalnoj strani lateralnog jezgra.Analizirali smo osnovne i bočne podatke odvojeno, ali nije bilo razlike u oba slučaja (podaci nisu prikazani) i obje oblasti su se srušile u podacima koje ovdje predstavljamo.Nismo analizirali podregije lateralne amigdale, tako da specifične promjene u ovoj oblasti mogu biti maskirane.Druga mogućnost da nema promjene u Fos aktivnosti u BLA je zbog tajminga sjećanja na strah u poređenju sa uslovljavanjem.Neki prethodni radovi su pokazali da doprinos BLA izražavanju straha opada s vremenom nakon kondicioniranja, tako da je ekspresija zavisna od BLA 24 sata nakon kondicioniranja, ali nezavisna 7 dana (ref. 45 ali vidjeti 58).dogodio se 48 sati nakon treninga, zbog čega nedostatak promjene u Fos aktivnosti u ovom trenutku vjerovatno odražava promjene koje zavise od vremena u učešću BLA u izražavanju straha.
Konačno, nalazimo dokaz da je uspješno pamćenje na izumiranje povezano s ventralnim hipokampusom.Ovo je karakteristično za "srednje" vHPC, jer isti obrazac nije viđen u stražnjoj regiji.U skladu s prethodnim radom, nismo pronašli promjenu u aktivaciji Fos u aferentnim vHPC IL-ima.Postoje značajni dokazi da je vHPC28,60,61 neophodan za aktualizaciju straha kada se CS javlja izvan konteksta u kojem se bledi, i da to barem dijelom ovisi o ulasku vHPC u IL13.Na osnovu ovih prethodnih rezultata, očekivali bismo da će slabo bledenje biti povezano sa povećanom predviđenom IL aktivnošću vHPC.Međutim, to nije bio slučaj jer nije bilo razlike u Fos aktivnosti u IL-projiciranim retrogradno označenim vHPC ili neobilježenim ćelijama u vHPC.Ovo sugerira da nemogućnost pamćenja blijeđenja u kontekstu blijeđenja može pokrenuti drugačiji mehanizam od straha od obnove.
Važno je napomenuti neka od inherentnih ograničenja dizajna i analize i kako ona utiču na naše zaključke.Prvo smo podijelili životinje na gornju i donju trećinu, a miševe na "dobre" i "loše" na osnovu rezultata prisjećanja na izumiranje.Ovo se radi kako bi se izbjegle grupne sheme koje dijele životinje u zasebne grupe iz sredine distribucije, ili grupne sheme koje isključuju životinje iz sredine distribucije, kao što je razdvajanje po medijani ili poređenje gornje i donje trećine štakora .želimo izbjeći ovu situaciju jer srednja podjela ne odražava varijabilnost ljudskih odgovora na traumu koju pokušavamo modelirati.Osim toga, dok nam poređenje gornje i donje trećine pacova omogućava upoređivanje grupa slične veličine, ovaj pristup zanemaruje životinje u centru distribucije i ne odražava precizno varijabilnost u reakcijama na ozljedu.Iako naša metoda može imati problema s heterogenom varijansom i poređenjem grupa s nejednakim veličinama uzorka, ona hvata ono što pokušavamo oponašati bolje od alternativnih metoda.
Ovdje predstavljeni rezultati pomažu nam da bolje razumijemo kako se individualne razlike u prisjećanju izumiranja odražavaju na razlike u aktivnosti neuronskih kola.Naši nalazi mogu biti relevantni za posttraumatski stresni poremećaj, za koji je poznato da je povezan s pretjeranim strahom i nemogućnošću eliminacije reakcija na strah.Pokazali smo da su razlike u prisjećanju na izumiranje povezane s razlikama u unutarnjoj i ekstrinzičkoj neuralnoj aktivnosti projektovanoj na IL.Ove razlike su raspoređene na različite regije duž anteroposteriorne ose, dodatno naglašavajući važnost procjene funkcije mozga na subregionalnom nivou.Nedostaci sadašnje metode uključuju relevantnost studije i fokus na muške glodare.Buduća istraživanja bi trebala utvrditi neurobiološke mehanizme koji su u osnovi učenja o izumiranju kod ženki glodara i koristiti metode za izvođenje uzročnih zaključaka.
Skupovi podataka korišteni i/ili analizirani u trenutnoj studiji dostupni su od odgovarajućih autora na razuman zahtjev.
Pavlov IP Kondicioniranje: studija fiziološke aktivnosti moždane kore.(Oxford University Press, 1927).
Rothbaum, BO, & Davis, M. Primjena principa učenja u liječenju posttraumatskih reakcija. Rothbaum, BO, & Davis, M. Primjena principa učenja u liječenju posttraumatskih reakcija.Rotbaum BO i Davis M. Primjena principa učenja u liječenju posttraumatskih reakcija.Rotbaum BO i Davis M. Primjena principa učenja u liječenju posttraumatskih reakcija.instalirati.New York College.nauku.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Pregled terapije izloženosti: zlatni standard za liječenje PTSP-a. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Pregled terapije izloženosti: zlatni standard za liječenje PTSP-a.Rauch SA, Eftekhari A. i Ruzek DI Pregled terapije izloženosti: zlatni standard tretmana za posttraumatski stresni poremećaj. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾：PTSP 治疗的黄金标准。 Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Pregled terapije izloženosti: zlatni standard za liječenje PTSP-a.Rauch, SA, Eftekhari, A. i Ruzek, DI Pregled terapije izloženosti: zlatni standard tretmana za posttraumatski stresni poremećaj.J. Rehabilitation.razvoj rezervoara 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Terapija dugom ekspozicijom: prošlost, sadašnjost i budućnost.Represija anksioznosti 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
g. Millard et al.Egzistencijalni i stečeni uzroci gubitka pamćenja kod posttraumatskog stresnog poremećaja: nalazi iz studije blizanaca.J. Psychiatrist.rezervoar za skladištenje.42(7), 515-520 (2008).
g. Millard et al.Neurobiološka osnova nemogućnosti prisjećanja blijedih sjećanja u posttraumatskom stresnom poremećaju.biologija.Psihologija.66(12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individualne razlike u strahu: Izolacija reaktivnosti na strah i fenotipovi oporavka od straha. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individualne razlike u strahu: Izolacija reaktivnosti na strah i fenotipovi oporavka od straha.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. i LeDoux, JE Individualne razlike u strahu: razlikovanje fenotipova reaktivnosti na strah i ponovnog uspostavljanja straha. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE 恐惧的个体差异：隔离恐惧反应和恐惧恢复表型。 Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individualne razlike u strahu: izolacija reakcije na strah i tabela za oporavak straha.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. i LeDoux, JE Individualne razlike u strahu: izolacija reakcija na strah i fenotip oporavka od straha.J. Trauma.pritisak 20(4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG Akustični odgovor na strepnju kod pacova predviđa međuindividualne varijacije u izumiranju straha. Russo, AS & Parsons, RG Akustični odgovor na strepnju kod pacova predviđa međuindividualne varijacije u izumiranju straha.Russo, AS i Parsons, RG Akustični odgovor na prepad kod pacova predviđa individualne razlike u izumiranju straha. Russo, AS & Parsons, RG 大鼠的声学惊吓反应预测恐惧消退的个体差异。 Russo, AS & Parsons, RGRusso, AS i Parsons, RG Akustični odgovor na prepad kod pacova predviđa individualne razlike u izumiranju straha.Neurobiology.studija.Memorija.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Individualna varijabilnost u prisjećanju na izumiranje straha povezana je sa fosforilacijom protein kinaze aktivirane mitogenom u infralimbičkom korteksu. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Individualna varijabilnost u prisjećanju na izumiranje straha povezana je sa fosforilacijom protein kinaze aktivirane mitogenom u infralimbičkom korteksu.Russo, AS, Lee, J. i Parsons, RG Individualna varijabilnost u izumiranju prisjećanja straha povezana je sa fosforilacijom protein kinaze aktiviranom mitogenom u infralimbičkom korteksu. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Sećanje na nestanak straha povezano je sa individualnim razlikama u perifernoj fosforifikaciji.Russo, AS, Lee, J. i Parsons, RG Individualne razlike u izumiranju straha tokom prisjećanja povezane su sa fosforilacijom protein kinaza aktiviranih mitogenom u korteksu donjih ekstremiteta.Psihofarmakologija 236(7), 2039–2048 (2019).